目的: 培养人真皮微血管内皮细胞，建立人真皮微血管内皮细胞低氧/复氧模型。方法: 采用酶消化及联合磁珠分选法，得到人真皮微血管内皮细胞( HDMECs) ，体外培养传至 P5 代，采用Ⅷ因子免疫荧光及 CD309、CD34 流式细胞学进行鉴定。用缺氧 Buffer 加低氧舱的方法低氧处理 P5 代 HDMECS。实验分为四组，Con 组不做任何处理、H8 组低氧 8 小时组，H8R12 组低氧 8 小时复氧 12 小时组、H8R24 组低氧 8 小时复氧 24 小时组。TUNEL( 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法) 染色法检测细胞凋亡，蛋白质印迹法( Western Blot) 检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3( Caspase-3) 蛋白的表达。结果: 联合法分离的细胞，经过 2 次 CD31 磁珠分选后，可见细胞短梭形，呈铺路石样。细胞传至P5，Ⅷ因子免疫荧光染色阳性率为( 95 ± 2. 61) % 。流式细胞仪检测 CD309 阳性率为( 95. 4 ± 1. 34) % ;CD34 阳性率为( 42. 5 ± 3. 23) % 。TUNEL 染色、Western Blot 结果显示: H8 组的细胞凋亡率和活化的Caspase-3 表达高于 Con 组( P < 0. 05) ，H8R12 组、H8R24 组细胞凋亡率和活化的 Caspase-3 表达高于 H8组( P < 0. 05) 。结论: 本研究采用磁珠分选的办法成功培养了 HDMECs，并且建立了 HDMECs 低氧/复氧模型，为临床研究游离皮瓣缺血再灌注损伤机制提供实验基础。