足菌肿除可根据临床症状诊断外，还可在实验室检查化验。例如细菌培养可确定病原菌种。

病原菌检查的方法有以下几种：

1.直接镜检：先将颗粒用生理盐水冲洗，然后放于载玻片上，加20 氢氧化钠1滴，在镜下检查，镜下可见团块由菌丝和孢子交织而成。菌丝宽而有分隔，直径约2～5µm，菌丝末端和颗粒的周边有许多肿胀*，有的颗粒中可见厚壁孢子。倘若没有宽大菌丝，则可能由放线菌引起。

2.培养：先在含有抗生素的沙堡琼脂上培养，然后再鉴定菌种。鉴别菌种在检查上十分重要，治疗后的菌种和治疗时是不一样的。

3.影像学检查：当骨受累时，用X线进行检查时会发现骨坏死，骨质疏松和小骨的融合，并有局限性骨肥大和骨溶解。肺部感染时可表现为广泛的浸润性阴影。

4.组织病理：组织病理检查时会发现皮肤和皮下组织具有瘘管的化脓性肉芽肿，可见典型颗粒。颗粒周围有中性粒*和其他炎症*浸润。

此外，少数足菌肿病例还可表现出退行性肌炎、骨膜炎、淋巴管炎、骨质溶解和骨纤维变性等变化。因此要注意预防。