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梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(EUSA)的原理是什么?怎样操作和解读

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日期:2007-1-3 15:16:00    来源:  编辑:admin

 

      该试验是用经纯化及超声裂解处理的梅毒螺旋体为抗原包被固相板条,加上梅毒血清和辣根过氧化酶标记的抗人IgG抗体,利用酶免疫法检测病人血清中的抗梅毒螺旋体特异性抗体。采用特异的梅毒螺旋体重组蛋白作为抗原,使试验更加敏感、特异。
    【方法】
    (1)取标本稀释液100微升加到反应板孔内,再加入待检血清lO微升,同时作阳性和阴性对照,置37~C孵育30分钟。
  (2)洗涤液洗板5次,拍干。
  (3)每孔加酶结合物100微升,置37~C孵育15分钟。
  (4)洗涤液洗板5次,拍干。
  (5)每孔加底物液A液、B液各1滴(各50微升),37℃避光孵育15分钟。
    (6)每孔加终止液1滴(50微升)终止反应。
    (7)置酶标检测仪450纳米波长测定光密度(OD值)。
   

结果判定:
    临界值=0.10+阴性对照平均OD值(阴性对照0D值<0.05时按O.05计算)。标本OD值<临界值时,结果为阴性。标本≥临界值,结果为阳性(或按各诊断试剂要求判定结果)。


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