FTA—ABS试验以完整形态的Nichol梅毒螺旋体作为抗原,加上经吸收剂(用Reiter株螺旋体制备而成)处理过的病人血清形成抗原抗体复合物,再加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白,与血清梅毒螺旋体抗体结合。在荧光显微镜下,螺旋体显示苹果绿色的荧光,即为阳性反应。
【方法】
(1)将血清标本于56~C灭活30分钟,备用。
(2)吸收剂加人5毫升无菌蒸馏水,用作血清的稀释。
(3)血清标本和吸收剂按1:5~1:20稀释,混匀后置有盖湿盒内于35~37℃孵育30分钟。
(4)将系列稀释的血清分别加到抗原片上(每孔不少于30微升),放人有盖湿盒内,置35~37℃孵育30分钟。
(5)用0.01摩尔/升的PBS冲洗抗原片,用磁力搅拌器低速以O.01摩尔/升PBS溶液洗涤抗原片,每5分钟更换PBS液1次,共3次。最后一次用蒸馏水冲洗一遍,冷风吹干备用。
(5)的洗涤和吹干。
(6)抗原片每个圈内加30微升荧光抗体(荧光抗体稀释为工作液),放湿盒35~37℃孵育30分钟。重复步骤
(7)抗原片加固封剂(甘油缓冲液)1滴,覆以盖玻片。在荧光显微镜下观察。
(8)试验对照:每批次试验包括下列对照。a.4+阳性血清和1+阳性血清对照,血清用PBS液和吸收剂分别按1:5—1:20稀释;b.非特异血清对照;c.染色对照:用O.01摩
尔/升PBS和吸收剂分别替代荧光抗体。
结果:
梅毒螺旋体均匀地发出中等或高强度的苹果绿色荧光为阳性
梅毒螺旋体均匀地发出弱苹果绿色荧光为弱阳性
梅毒螺旋体呈微弱黄色光或观察不到荧光为阴性